Ответ клеток БАЛ пациентов с саркоидозом на Propionibacterium acnes
by Mikio Kataoka; Yasunari Nakata; Jun-ichi Hiramatsu; Takayuki Kamao; Yoshihiro Mori; Katsuhiko Shiomi; Tohru Hioka; Tohgo Ejiri; Yasushi Tanimoto; Arihiko Kanehiro; Mitsune Tanimoto
Department of Medicine and Faculty of Health Sciences, Okayama University Medical School, 2-5-1 Shikata-cho, Okayama City, Okayama, 700-8558 Japan
Цель: несмотря на обширные исследования патогенеза саркоидоза, его этиология все еще остается неизвестной. Недавно, ДНК пропионибактерий была изолирована с помощью ПЦР в саркоидных тканях и клетках БАЛ человека. В этой работе мы исследовали ответ клеток БАЛ на Propionibacterium acnes. Методы: клетки были получены из БАЛ пациентов с саркоидозом, при болезнях легкого, иных, чем саркоидоз и у здоровых добровольцев. Мы оценили пролиферативный ответ, производство IL-2, экспрессию мРНК IL-2R лимфоцитов, стимулируемых P. acnes и уровни антител к P. acnes в БАЛ. Мы измерили производство IL-1, ФНО-альфа и IL-6 стимулированных P. acnes альвеолярных макробактериофагов. Результаты: Средний индекс возбуждения и производство IL-2 лимфоцитов, стимулируемых P. acnes были значительно выше у пациентов с саркоидозом по сравнению с другими болезнями легкого или здоровыми добровольцами. Индекс возбуждения у коррелировал с числом лимфоцитов и количеством CD4-+ лимфоцитов в БАЛ. Более высокие уровни IL-1, ФНО-альфа, IL-6 были найдены у пациентов с саркоидозом чем здоровых добровольцев. Уровни антител к P. acnes в БАЛ были значительно выше у пациентов с саркоидозом чем у здоровых добровольцев. Заключение: лимфоциты пациентов с саркоидозом, чувствительные к P. acnes, могут инициировать начало альвеолита и формирование гранулем в паренхиме легкого пациентов с саркоидозом.
Propionibacterium acnes могут вторгаться в клетки, возможно ведя к саркоидозу?
by Yuki Ishige; Ikuo Ishige; Intetsu Kobayashi; Kunimoto Watanabe; Tamiko Takemura; Kazuo Iwai; Yoshinobu Eishi
Department of pathology, Tokyo Medical and Dental University, Tokyo, Japan; Chemotherapy Division, Mitsubishi Kagaku Bio-clinical Laboratory, Tokyo, Japan; Institute of Anaerobic Bacteriology, Gifu University, Gifu, Japan; Department of pathology, Japanese Red Cross Medical Center, Tokyo, Japan; Division of Molecular Pathology, The Research Institute of Tuberculosis, Tokyo, Japan
Введение: причина саркоидоза неизвестна. Propionibacterium acnes были изолированы из культуры клеток БАЛ и геном P. acnes был обнаружен в саркоидных лимфатических узлах с помощью ПЦР. Если эта бактерия фактически вторгается в клетку, ее внутриклеточное персистирование может вызывать гранулематозное воспаление, характерное для саркоидоза. Штаммы P. acnes, изолированные из органов (не саркоидоз) были исследованы на способность вторгаться в линии клеток, происходящих из эпителия, скелетной мышцы или стромы. Материалы и методы: мы исследовали 25 штаммов P. acnes из кожи (не саркоидоз), конъюнктивы, кишечника, легких и лимфатических узлов (5 штаммов из каждого органа) и также штамм ATCC 6919. Бактерии, вторгшиеся в клетки были подсчитаны с помощью cell-invasion assay (Facinelli et al., Lancet 2001; 358:30), в котором бактерии внутри клеткок пережили антибиотикотерапию. Используемые линии клеток были аденокарцинома легкого A549, альвеолярно-клеточная карцинома SW1573, аденокарцинома толстого кишечника HT-29, рабдомиосаркома SJRH30, диплоидные эмбриональные фибробласты легкого WI38 и клетки 1-5c-4 конъюнктивы (не саркоидоз). Результаты: 18 (69 %) из 26 штаммов P. acnes, захватывали по крайней мере два вида клеток. Штаммы типа ATCC не вторгалось в клетки. Никакие штаммы не вторглись в HT-29 клетки. 10 (38 %) из 26 штаммов вторглись в эпителиальные клетки 1-5c-4, A549 и SW1573 и также в клетки скелетной мышцы SJRH30 и фибробласты WI38. Заключение: вторжение P. acnes в культуры эпителиальных, скелетных и стромальных клеток говорит о том, что эта бактерия может вторгаться в клетки in vivo. Если вторжение P. acnes персистирует, это может быть причиной гранулематозного воспаления при саркоидозе.
Филогенетические исследования Propionibacterium acnes из саркоидных лимфатических узлов
by Ikuo Ishige1); Koh Nakata2); Intetsu Kobayashi3); Tamiko Takemura4); Kazuo Iwai5) ; Yoshinobu Eishi1)
1) Department of Human Pathology, Tokyo Medical and Dental University, Tokyo, Japan; 2) Department of Respiratory Diseases, Research Institute, International Medical Center of Japan, Tokyo, Japan; 3) Chemotherapy Division, Mitsubishi Kagaku Bio-clinical Laboratory, Tokyo, Japan; 4)Department of Pathology, Japanese Red Cross Medical Center, Tokyo, Japan; 5) Division of Molecular Pathology, The Research Institute of Tuberculosis, Tokyo, Japan 1) Department of Human Pathology, Tokyo Medical and Dental University, Tokyo, Japan 2) Department of Respiratory Diseases, National Medical Center of Japan Research Institute, Tokyo, Japan 3) Chemotherapy Division, Mitsubishi Kagaku Bio-clinical Laboratory, Tokyo, Japan 4)Institute of Anaerobic Bacteriology, Gifu University, Gifu, Japan 5) Department of Pathology, Japanese Red Cross Medical Center, Tokyo, Japan 6) Division of Molecular Pathology, The Research Institute of Tuberculosis, Tokyo, Japan
Введение: пропионибактерии были предложены как причинный агент саркоидоза, так как они часто и в изобилии изолируются в гранулематозных повреждениях и известно, что они способны вызывать формирование гранулем в животных моделях, хотя бактерии широко распространены в здоровых органах. Чтобы установить, определяется ли этиология саркоидоза специфическими Propionibacterium starins или ненормальностями иммунного ответа хозяина на бактерии, мы сравнили бактериальный геном у бактерий, изолированых из саркоидных гранулем и из здоровых органов. Методы: мы исследовали 119 штаммов P. acnes из 50 саркоидных лимфатических узлов, 19 из лимфатических узлов (не саркоидоз), 18 из легких (не саркоидоз), 16 из кожи (не саркоидоз) и 16 из конъюнктивы (не саркоидоз). ДНК каждого штамма была усилена с помощью ПЦР. Коэффициенты подобия штаммов были расчитаны на основании паттерна электрофореза продуктов ПЦР. Средние коэффициенты подобия были сравнены с помощью теста Стьюдента. Результаты: штаммы из одного органа были сформировали в группы. Среди 69 штаммов, изолированных из лимфатических узлов, генотипы изолированных из саркоидных лимфатических узлов были подобны изолированным из лимфатических узлов (не саркоидоз). С другой стороны, различие между штаммами, изолированными из саркоидных лимфатических узлов из кожи (не саркоидоз) и легких было статистически существенным. Заключение: формирование гранулемы при саркоидозе происходит не из-за специфических штаммов пропионибактерий, но, вероятно, из-за ненормальности иммунного ответа хозяина на бактерии.
Borrelia burgdorferi не является причиной саркоидоза. Мнение офтальмолога.
by Anni Karma;
Department of Ophthalmology, University of Helsinki, Helsinki, Finland
Введение: Borrelia burgdorferi недавно была добавлена к списку агентов, возможно участвующих в этиологии саркоидоза. В Финляндии, Лаймский боррелиоз эндемичен для больших областей, распространенность саркоидоза в них также высока. Обе болезни имеют общие клинические особенности, но также и отличаются по многим важным параметрам. Вовлечение суставов, кожи и неврологические проявления наблюдаются при обеих болезнях, но легочные изменения не наблюдаются при Лаймском боррелиозе, а мигрирующая эритема не наблюдается при саркоидозе. Также, имеются важные различия в клинической картине этих болезней. Материалы и методы: было произведено сравнение клинических характеристик 20 пациентов с Лаймским боррелиозом глаз и 50 пациентов с саркоидозом глаз в течение 1-12 лет. Диагноз Лаймского боррелиоза был основан на наличии мигрирующей эритемы или, в последней стадии болезни, на системных проявлениях плюс присутствие антител к Borrelia burgdorferi в сыворотке (во многих случаях положительная ПЦР) и/или спиномозговой жидкости. Диагноз саркоидоз был основан на клинико-рентгенологических результатах совместимых с саркоидозом и почти всегда на гистологическом подтверждении. Результаты: нейроофтальмологические проявления, интерстициальный кератит, эписклерит и нейроретинит доминировали в клинической картине боррелиоза глаз. Подострый гранулематозный увеит, уменьшение секреции слез и конъюнктивальный гранулематоз были наиболее обычными особенности саркоидоза глаз. Прогноз для пациентов с увеитом Лайма хуже чем для пациентов с саркоидным увеитом. Антитела к Borrelia burgdorferi были обнаружены у 2 пациентов с саркоидозом, но уровень АПФ был нормален у всех пациентов с боррелиозом. Заключение: Borrelia burgdorferi не является причиной саркоидоза.
Связь между туберкулезом и саркоидозом в эпидемиологическом исследовании в Японии
by S Akagawa; A Kurashima; K Machida; H Yotsumoto
National Tokyo Hospital, Japan
Хотя причина саркоидоза не была идентифицирована, из-за патологического подобия, микобактериии изучаются в качестве возможного причинного агента саркоидоза. Чтобы исследовать связь между этими двумя болезнями, мы произвели опрос среди 15 национальных клиник в Японии. Вопросы включали число стационарных больных с туберкулезом, число стационарных больных с саркоидозом, число пациентов, страдающих от обеих болезней и клинический курс этих болезней за десятилетний период с 1989 г. до 1998 г. Имелись 11,171 пациентов с туберкулезом, 218 пациентов с саркоидозом и 6 пациентов, имеющих обе болезни в течение указанного периода. Заболеваемость саркоидозом у пациентов с туберкулезом в этом обзоре была 53.7/100,000 что значительно выше по сравнению с заболеваемостью саркоидозом во всей популяции 7.5-9.3/100,000. Однако, 4 из 6 пациентов с саркоидозом и туберкулезом лечили стероидами, которые, вероятно, дают увеличенный риск развития туберкулеза. Заболеваемость саркоидозом у пациентов с туберкулезом не леченными стероидами уменьшается до 17.9/100,000. Этот результат существенно не различается от распространенности саркоидоза во всей популяции. Эти результаты поддерживают мнение, что туберкулез не может быть причиной саркоидоза.
Изменение структуры легкого при саркоидозе: исследование 65 случаев аутопсии
by Tamiko Takemura; Soichiro Ikushima; Takashi Yanagawa; Tsunehiro Ando; Osamu Akiyama; Masaru Oritsu; Yasuo Matsui; Yoshinobu Eishi; Riichiro Mikami.
Depts. of Pathology and Respir. Dis., Japanese Red Cross Medical Center, Health and Medical Center of Teito Rapid Transit Authority, Tokyo Medical and Dental University, and National Sagamihara Hospital 4-1-22 Hiroo, Tokyo 150-8935, Japan
Мы исследовали легкие в 65 случаях аутопсии, пытаясь выяснить, как происходит фиброз и изменение архитектуры легкого при саркоидозе. Легочный саркоидоз был у 18 пациентов, кардиосаркоидоз у 31 пациента, нейросаркоидоз у 3 пациентов и саркоидоз без серьезного вовлечения органов у 13 пациентов. Средняя продолжительность болезни была 13 лет для легочного саркоидоза и 6 лет для кардиосаркоидоза. При кардиосаркоидозе или нейросаркоидозе, легкие у большинства пациентов имели гранулемы и фиброз. Гранулемы, особенно в бронхиолах и в междольковых перегородках, производили звезчатый (stellate) и лентовидный (band-like) фиброз, часто сопровождаемый вовлечением сосудов. Длительный легочный саркоидоз причинял уменьшение верхней доли в 13 (72 %) из 18 случаев и сотовые повреждения в 10 (56 %). Бронховаскулярное вовлечение, фиброз с перибронхиальным ателектазом могут быть главными причинами такого сокращения. Очевидно, в патогенезе сотовых повреждений при легочном саркоидозе, фиброз возникает в бронхиолах, альвеолярной стенке и на периферии, смежно с междольковыми перегородками. В трех случаях, имелась интерстициальная пневмония, гистологически совместимая с UIP или NSIP, возможно производившая непредвиденные осложнения при саркоидозе. Слияние гранулем в легочной паренхиме, вовлечение сосудов, лимфатических узлов и ателектаз, играют важную роль в изменении архитектуры легкого при саркоидозе.
Морфологический анализ лимфоцитов в БАЛ пациентов с саркоидозом и другими болезнями
by Kuniko Matuda, Takuo Takahashi, Arata Azuma, Keitaro Sakakibara Tatuji Enomoto, Jiro Usuki, Oichi Kawanami, Kunitoshi Ohara, and Shoji Kudoh
Fourth Department of Internal Medicine; Department of Molecular Pathology Institute of Gerontology; Department of Ophthalmology, Nippon Medical School, Tokyo, Japan.
Лимфоциты в БАЛ пациентов с саркоидозом часто маленькие и зрелые, но клиническое значение этого остается неясным. В этом исследовании мы проанализировали морфологические различия лимфоцитов БАЛ пациентов с саркоидозом и другими болезнями и обсудили возможность использования этих различий как маркера саркоидоза. В этом исследовании участвовали 123 пациента. Все пациенты были разделены на четыре группы: A) гистологически доказанный саркоидоз, B) подозреваемый саркоидоз при патологии рентгенограммы, C) подозреваемый саркоидоз при вовлечении глаз, D) другие легочные болезни. БАЛ был обработан красителем Мэя-Гимза. Мы установили стандарт на содержание более половины маленьких и зрелых лимфоцитов в БАЛ. Норма положительных образцов в каждой группе была 83.7 %, 100 %, 90.9 %, 6.15 % в группах A, B, C, D соответственно. Имелось статистически существенное различие между группами с саркоидозом (A, B и C) и группой D. Маленькие и зрелые лимфоциты - одна существенных характеристик саркоидоза. Наша находка предполагает, что морфологическое различие между лимфоцитами в БАЛ может быть маркером при диагнозе саркоидоза.
Экспансия AV2S3+ T-клеток как маркер болезни у HLA-DR17+ пациентов с саркоидозом
by Anders Planck ; Anders Eklund ; Johan Grunewald
Department of Medicine, Division of Respiratory Medicine, Karolinska Hospital, Stockholm, Sweden
Введение: в начале болезни, Скандинавские HLA-DR17+ пациенты с саркоидозом имеют локальное накопление CD4+ T-лимфоцитов в БАЛ, с экспрессированным V сегментом гена рецептора T-клеток AV2S3. Цель этого исследования состояла в том, чтобы исследовать, сохраняется ли этот феномен, когда клинические признаки болезни исчезают и как эти клетки связаны с другими воспалительными маркерами в БАЛ. Методы: БАЛ девяти DR17+ пациентов с саркоидозом был исследован в начале болезни (BAL1) и после разрешения клинических признаков болезни, включая нормализацию рентгенограммы и спирометрии (BAL2). Ни у одного пациента не проводилась кортикостероидная терапия и все пациенты имели спонтанное разрешение в пределах 2 лет от начала болезни. Концентрация клеток и процент лимфоцитов были исследованы с помощью световой микроскопии. Проточная цитометрия использовалась, чтобы исследовать экспрессию T-лимфоцитов CD4, CD8 и AV2S3. Результаты: по сравнению BAL1 и BAL2 имелось уменьшение процента AV2S3+ CD4+ T-лимфоцитов (29 % по сравнению с 5.4 %; p < 0.01), концентрация клеток в БАЛ (179x106/L по сравнению с 111x106/L; p=0.05) и процента лимфоцитов (14 % по сранению с 4.4 %; p < 0.01). Та же самая тенденция, хотя менее существенная, была замечена для отношения CD4/CD8 в БАЛ (5.2 по сранению с 2.4; p=0.07). Заключение: результаты усиливают подозрения об участии AV2S3+ T-лимфоцитов в патогенезе саркоидоза у Скандинавских DR17+ пациентов. Так как накопление этих клеток сопровождает другие воспалительные маркеры в БАЛ, мы предполагаем, что это может быть полезным маркером активности болезни в этой специфической группе пациентов.
Цитология индуцированной мокроты по сравнению с бал при легочном саркоидозе
by K.Osolnik, I.Kern, P.Korosec, M.Kosnik
University Clinic of Respiratory and Allergic Diseases, 4204 Golnik, Slovenia
Введение: индуцированная мокрота (IS) позволяет осуществлять атравматичное взятие клеток из дыхательных путей. БАЛ - стандартный тест при постановке диагноза и оценке воспаления при легочном саркоидозе, но является более агрессивной процедурой. Целью исследования являлся поиск корреляции между клеточными компонентами IS и БАЛ. Метод: материалы IS и БАЛ были сравнены у 14 пациентов с гистологически установленным легочным саркоидозом. Цитоцентрифугиоционные слайды были окрашены и было определено соотношение воспалительных клеток с особым вниманием к многоядерным гигантским клеткам. Результаты: связь пропорций воспалительных клеток в IS и БАЛ с помощью корреляционных коэффициентов Пирсона не была существенной. Многоядерные гигантские клетки были найдены в 3 экземплярах IS и в 5 экземплярах БАЛ. Заключение: по нашим данным, IS не может заменить БАЛ как диагностический инструмент при легочном саркоидозе. IS может давать некоторую информацию у пациентов, у которых проведение БАЛ противопоказано и требует особого внимания к присутствию многоядерных гигантских клеток.
Th1 клетки и KL-6 при саркоидозе
by Takako Kawai; Kiyoshi Katoh; Akiko Okouchi; Makoto Kudo; Masataka Shoda; Masao Ishii.
Department of Internal Medicine, Yokohama Seamen's Insurance Hospital, Yokohama, Japan
Ранее сообщалось, что гликопротеид KL-6 является серологическим маркером интерстициальной пневмонии. Он главным образом производится альвеолярными клетками типа II и действует как фактор хемотаксиса для фибробластов. Гранулоцито-макрофагный колониестимулирующий фактор (GM-CSF) стимулирует пролиферацию фибробластов. Чтобы разъяснять механизм формирования гранулемы и фиброза при саркоидозе, мы культивировали клетки бронхоальвеолярного лаважа in vitro. Мы изучали 13 пациентов с саркоидозом и 5 здоровых индивидуумов. KL-6 был измерен с помошью твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA). Клетки БАЛ были культивированы в RPMI1640 с IL-2, IL-4 и GM-CSF. У пациентов с саркоидозом, серологические уровни KL-6 были увеличены по сравнению с здоровыми индивидуумами из группы контроля. При культивировании с IL-2, при саркоидозе наблюдалось накопление клеток. Рецепторы антител к IL-2 предотвращали этот ответ. Индуцированное GM-CSF веретено деления (spindle) профилировало формирование клеток, но эта реакция была уменьшена при саркоидозе. Не имелось никакой корреляции между накоплением клеток и уровнями KL-6 в БАЛ. Эти результаты предполагают, что клетки T-хелпер и IL-2 играют некоторую роль в формировании гранулемы при саркоидозе. Ответ на GM-CSF у этих пациентов уменьшен.
Отношение CD4/CD8 в БАЛ при легочном саркоидозе
by T.Peros-Golubicic, J.Tekavec-Trkanjec, V.Mlinarevic, I.Aleric, S.Smojver
University Clinic for Lung Diseases, 10000 Zagreb, Jordanovac 104, Croatia
Введение: отношение CD4+/CD8 + в бронхоальвеолярном лаваже (БАЛ) часто увеличено у пациентов с легочным саркоидозом. Цель исследования состояла в том, чтобы оценить чувствительность отношения CD4/CD8 в БАЛ как диагностического теста в группе из 70 пациентов с доказанным биопсией и клинически очевидным легочным саркоидозом. Методы: лимфоциты БАЛ были проанализированы с помощью проточной цитометрии, чтобы определить отношение CD4/CD8. Мы сравнили группы пациентов с отношением > 4 и < 4 с некоторыми клиническими и лабораторными данными. Результаты. у пациентов с легочным саркоидозом отношение CD4/CD8 располагалось в диапазоне 0,2-23,5, средняя величина 6,7. Отношение CD4/CD8 было больше 4 у 47 (67 %) пациентов и только у двух (1,4 %) было меньше 1. Пациенты с отношением CD4/CD8 > 4 имели значительно больший индекс лимфоцитов в БАЛ (p<0,005) и имели тенденцию иметь низкий DLCO (p< 0,006), Никакой существенной корреляции не было найдено между клиническими (возраст, пол, острая или хроническая болезнь) и лабораторными данными (рентгенографическая стадия, тесты функции легкого - VC, FEV1, DLco). Заключение: измерение отношения CD4/CD8 в нашей группе пациентов с легочным саркоидозом показало чувствительность 67 %, так что это может рассматриваться как ценный диагностический тест, с удовлетворительной чувствительностью.
Различия в бал при экзогенном аллергическом альвеолите и саркоидозе
by Tsakanika C; Liapi E; Xyfteri A; Mermigkis D; Karragiannidis N; Polychronopoulos V
Sismanoglio G.D.H.A, Athens, Greece
Введение: экзогенный аллергический альвеолит (EAA) и легочный саркоидоз (PS) - два различных клинических состояния, на первый взгляд имеющие похожие профили БАЛ. Однако, цитоморфологическое исследование может показать некоторые существенные различия между этими двумя клиническими состояниями, облегчая их диагностическое исследование. Методы: проводилось ретроспективное изучение БАЛ 32 пациентов, госпитализированных в течение последних двух лет (13 с EAA и 19 с PS). Популяции лимфоцитов в БАЛ были определены иммуноцитохимическими методами. Результаты: увеличенное число CD57+ NK клеткок также как и присутствие макрофагов и плазматических клеток имело чувствительность 97%, специфичность 90 %, положительную прогностическую ценность 47 % и отрицательную прогностическую ценность 99 %. Иммуноцитологическая классификация субпопуляций лимфоцитов при EAA показала относительное увеличение числа CD8 клеток и уменьшение числа CD4 клеток, что уменьшало отношение CD4/CD8. Вышеупомянутое отношение было более чем 3.5 раза больше во всех случаях саркоидоза. Заключение: исследование БАЛ облегчает клинический и первичный диагноз EAA и PS.
Серьезность недавно диагностированного легочного саркоидоза, отражаемая параметрами бронхоальвеолярного лаважа
by Zora Pavlovic-Popovic; B. Djuric
Institute for Pulmonary Diseases Sremska Kamenica, Yugoslavia
Цель исследования состояла в том, чтобы определить, какой из параметров БАЛ отражает серьезность недавно диагностированного легочного саркоидоза. Нелеченная группа из 104 пациентов с доказанным биопсией, недавно диагностированным саркоидозом была включена в это исследование. Пациенты были разделены на 3 группы, в зависимости от клинических критериев: 40 пациентов с синдромом Лёфгрена, 45 пациентов с устойчивой болезнью и 19 пациентов с прогрессирующей болезнью, у которых должна быть начата системная стероидная терапия. Полный индекс клеток, процент альвеолярных макрофагов и лимфоцитов и отношение CD4/CD8 не были связаны с серьезностью болезни. Мы наблюдали существенное увеличение числа нейтрофилов (6,1±0,9 %; p < 0,0005) по сравнению с группой контроля и эозинофилов у пациентов с саркоидозом с прогрессом болезни (2,1±0,3 %; p = 0,0005) по сравнению с группой контроля. Связь между увеличенным процентом нейтрофилов в БАЛ и потребности в системной стероидной терапии наблюдалась не только у пациентов с саркоидозом стадии III или IV, но также и у пациентов с саркоидозом с более ранними стадиями I и II. Наши результаты демонстрируют, что увеличение процента нейтрофилов (> 4,0 %) и эозинофилов (> 2,0 %) в БАЛ у недавно диагностированных пациентов с саркоидозом отражает серьезность болезни и может быть полезным маркером прогресса болезни.