Thorax 2000;55:696-699

Корреляция отношения CD4:CD8 и уровня фактора некроза опухоли альфа в индуцированной мокроте и бронхоальвеолярном лаваже при легочном саркоидозе

Yuben P Moodley, Trevor Dorasamy, Salosh Venketasamy, Vincent Naicker, Umesh G Lalloo
Respiratory Unit, Department of Medicine, University of Natal, Private Bag 7, Congella 4013, South Africa, Department of Haematology

Реферат

Введение: увеличенное отношение CD4:CD8 и увеличенные уровни цитокинов в бронхоальвеолярном лаваже (БАЛ) характерны для легочного саркоидоза. Индукция мокроты использовалась как атравматичный метод исследования дыхательных путей, который может быть полезен при исследовании воспаления у пациентов с саркоидозом, у которых присутствует эндобронхиальное, перибронхиальное и паренхиматозное воспаление. Мы стремились найти корреляцию между полным и дифференциальным индексом клеток, отношением CD4:CD8 и уровнями фактора некроза опухоли альфа (TNF-alpha) между индуцированной мокротой и БАЛ пациентов с легочным саркоидозом. Методы: были исследованы 14 пациентов с недавно диагностированным, доказанным биопсией легочным саркоидозом и 6 здоровых индивидуумов в группе контроля. Исследования индуцированной мокроты и БАЛ были выполнены при начальном посещении и повторены через 6 месяцев лечения оральным преднизоном. Результаты: не было обнаружено корреляции между индуцированной мокротой и БАЛ по дифференциальному индексу клеток. Отношение CD4:CD8 в индуцированной мокроте сильно коррелировало с отношением CD4:CD8 в БАЛ (5.5 (0.4:1) и 4.4 (0.2:1); r = 0.8, p < 0.001) и параллельно уменьшалось после 6 месяцев лечения (3.4 (0.2:1) по сравнению с 2.4 (0.2:1)). Уровни TNF-alpha в индуцированной мокроте, также коррелировали с уровнями TNF-alpha в БАЛ (11.9 (1.5) pg/ml и 17.6 (2.7) pg/ml; r = 0.8, p < 0.001). Уменьшение уровней TNFalpha после 6 месяцев лечения было параллельно уменьшению уровней TNF-alpha в БАЛ (6.7 (0.9) pg/ml и 11.6 (1.3) pg/ml). Заключение: отношение CD4:CD8 и уровни TNF-alpha в индуцированной мокроте коррелируют с отношением CD4:CD8 и уровнями TNF-alpha в БАЛ и измененяются параллельно при лечении. Индуцированная мокрота, поэтому, по некоторым параметрам, может быть атравматичной заменой БАЛ у пациентов с саркоидозом.

Введение

Саркоидоз - мультисистемная гранулематозная болезнь неизвестной этиологии, которая воздействует преимущественно на легкое (1). Увеличенное отношение CD4:CD8 в БАЛ характерно для саркоидоза, но не специфично (2). Имееются противоречивые данные относительно роли БАЛ как маркера активности болезни (2).

Недавно был разработан метод индукции мокроты ингаляцией гипертонического солевого раствора, как способ получения секрета дыхательных путей. Этот метод использовался, чтобы исследовать воспалительные клетки у пациентов с астмой (3) и хронической обструктивной болезнью легких (4). Уровни TNF-alpha увеличены при гранулематозном воспалении у пациентов с саркоидозом (5). При саркоидозе присутствует эндобронхиальное, перибронхиальное и паренхиматозное воспаление (6). Поэтому, мы выдвигаем гипотезу, что вовлечение дыхательных путей при саркоидозе делает возможным изучение этого состояния с помощью исследования индуцировнной мокроты и что отношение CD4:CD8 и уровни TNF-alpha в солевой фазе индуцированной мокроты коррелируют с отношением CD4:CD8 и уровнями TNF-alpha в БАЛ.

Цель этого исследования состояла в том, чтобы исследовать дифференциальный индекс клеток, отношение CD4:CD8 и уровни TNF-alpha в индуцированной мокроте и БАЛ в начале и после 6 месяцев лечения оральным преднизоном у пациентов с саркоидозом.

Методы

Пациенты

В исследовании участвовали 17 пациентов с недавно диагностированным, доказанным биопсией легочным саркоидозом из Respiratory Unit of King Edward VIII Hospital, Дурбан, Южная Африка. Из них, 14 пациентов (7 мужчин) средний возраст 40.6 лет. У них проводилось лечение преднизоном с начальной дозировкой 40 милиграмм в день перорально в течение 6 недель со снижением к 10 милиграмм в день за 6 месяцев.

Группа контроля включала 12 здоровых некурящих добровольцев без аллергии, средний возраст 41 год, согласованных по возрасту, полу и расе. Они не имели никаких респираторных болезней за 6 недель до начала исследования.

Протокол исследования

Комитет по этике University of Natal одобрил исследование и письменное информированное согласие было получено у всех пациентов до начала исследования. Спирометрические тесты, уровни АПФ, функция печени, исследования мочи и электролитов, полный анализ крови, серологический уровень кальция, экскреция кальция в моче за 24 часа, рентгенограмма легких и компьютерная томография с высоким разрешением (КТВР) были выполнены у всех пациентов. КТВР была выполнена как часть большего исследования корреляции функция легкого и рентгенологических особенностей саркоидоза с выдыхаемыми уровнями окиси азота у пациентов. Индуцированная мокрота была получена в начале исследования и через 4 дня, чтобы проверить воспроизводимость дифференциального индекса клеток. БАЛ выполн 4 днями позже. Индуцированная мокрота и БАЛ были повторно выполнены через 6 месяцев.

Результаты

Полный и дифференциальный индекс клеток в индуцированной мокроте у пациентов с саркоидозом в начале исследования и через четыре дня были воспроизводимы: полный индекс клеток (r = 0.8), макрофаги (r = 0.8), лимфоциты (r = 0.8), нейтрофилы (r = 0.7) и эозинофилы (r = 0.8) (в скобках коэффициенты корреляции).

Полный индекс клеток, отношение CD4:CD8 и уровни TNF-alpha были значительно выше в индуцированной мокроте и в БАЛ пациентов с саркоидозом чем в группе контроля.

Не имелось никакой корреляции между дифференциальным индексом клеток в БАЛ и мокроте: макрофаги, r> 0.07, p> 0.8; лимфоциты, r> 0.2, p> 0.5; и нейтрофилы r> 0.4, p> 0.4. Отношение CD4:CD8 в индуцированной мокроте сильно коррелировало с отношением CD4:CD8 в БАЛ: 5.5 (0.4:1) (95 % CI 3.5-6.4) по сравнению с 4.4 (0.2:1) (95 % CI 3.2-4.9), r> 0.8, p < 0.001. Уменьшение отношения CD4:CD8 после 6 месяцев лечения оральным преднизоном в мокроте было параллельным с БАЛ: 3.4 (0.2:1) (95 % CI 2.1-3.7) по сравнению с 2.4 (0.2:1) (95 % CI от 2.1 до 2.7), r > 0.8, p < 0.001. Уровни TNF-alpha в мокроте также коррелировали с уровнями TNF-alpha в БАЛ: 11.9 (1.5) pg/ml (95 % CI 9-16) по сравнению с 17.6 (2.7) pg/ml (95 % CI от 14 до 25), r > 0.8, p < 0.001. Уменьшение уровней TNF-alpha в мокроте после 6 месяцев лечения было параллельным с БАЛ: 6.7 (0.9) pg/ml (95 % CI 3-8) по сравнению с 11.6 (1.3) pg/ml (95 % CI 5-17), r> 0.8, p < 0.001.

Не имелось корреляции между отношением CD4:CD8, уровнями TNF-alpha в индуцированной мокроте и БАЛ и другими маркерами активности болезни.

Обсуждение

Это исследование показало сильную корреляцию между отношением CD4:CD8 и уровнями TNF-alpha в индуцированной мокроте и БАЛ в начале и после 6 месяцев лечения оральным преднизоном. Уменьшение отношения CD4:CD8 и уровней TNF-alpha в БАЛ после лечения преднизонов происходило параллельно уменьшению отношения CD4:CD8 и уровней TNF-alpha в индуцированной мокроте. Однако, имеется слабая корреляция по субпопуляциям клеток между БАЛ и мокротой.

Полный индекс клеток в БАЛ был выше, чем сообщалось в одних отчетах (2), но ниже, чем в других (8). Эти несоответствие, вероятно, происходило из-за различий в методах исследования БАЛ (9). Дифференциальный индекс клеток в этом исследовании соответствовал большинству других работ (8). Слабая корреляция между индексами макрофагов и лимфоцитов в индуцированной мокроте и БАЛ - вероятно следствие того, что образцы БАЛ были получены из более нижних отделов легкого чем индуцированная мокрота (10).

Сильная корреляция отношения CD4:CD8 в индуцированной мокроте и БАЛ у пациентов с саркоидозом может отражать воспаление в проксимальных и дистальных отделах легкого. Имелось значительное увеличение уровней TNF-alpha в индуцированной мокроте и БАЛ у пациентов с саркоидозом по сравнению с группой контроля, что отражает увеличение синтеза этого цитокина при активном легочном саркоидозе, что подтверждается предыдущими наблюдениями (5).

Отношение CD4:CD8 и уровни TNF-alpha в индуцированной мокроте и БАЛ не коррелировали с другими маркерами активности болезни типа уровней АПФ и FEV1, вероятно, потому что различные маркеры отражают различные аспекты процесса болезни.

Это исследование показало, что отношение CD4:CD8 и уровни TNF-alpha в индуцированной мокроте коррелируют с отношением CD4:CD8 и уровнями TNF-alpha в БАЛ и измененяются параллельно при лечении. Индуцированная мокрота, поэтому, по некоторым параметрам, может быть атравматичной заменой БАЛ у пациентов с саркоидозом.